熱循環(huán)儀(PCR儀)
簡要描述:1、模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;
產(chǎn)品型號: K640
所屬分類:循環(huán)泵
更新時間:2024-12-03
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,簡稱PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。 它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、 快速、 簡便、重復(fù)性好、易自動化等突出優(yōu)點(diǎn);能在一個試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時內(nèi)擴(kuò)增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一根毛發(fā)、一滴血、甚至一個細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情,用PCR幾小時便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性創(chuàng)舉和里程碑。
二、PCR基本原理
基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:
1、模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;
2、模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對結(jié)合;
3、引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需2~4分鐘,2~3小時就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍(Plateau)。到達(dá)平臺期所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。
在此同時認(rèn)識到蛋白質(zhì)是接受RNA的遺傳信息而合成的。50年代Zamecnik等在形態(tài)學(xué)和分離的亞細(xì)胞組分實(shí)驗(yàn)中已發(fā)現(xiàn)微粒體(microsome)是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成的部位;1957年Hoagland、Zamecnik及Stephenson等分離出tRNA并對它們在合成蛋白質(zhì)中轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸的功能提出了假設(shè);1961年Brenner及Gross等觀察了在蛋白質(zhì)合成過程中mRNA與核糖體的結(jié)合;1965年Holley*測出了酵母丙氨酸t(yī)RNA的一級結(jié)構(gòu);特別是在60年代Nirenberg、Ochoa以及Khorana等幾組科學(xué)家的共同努力破譯了RNA上編碼合成蛋白質(zhì)的遺傳密碼,隨后研究表明這套遺傳密碼在生物界具有通用性,從而認(rèn)識了蛋白質(zhì)翻譯合成的基本過程。
從分子生物學(xué)的發(fā)展過程,可以看到在近半個世紀(jì)中它是生命科學(xué)范圍發(fā)展zui為迅速的一個前沿領(lǐng)域,推動著整個生命科學(xué)的發(fā)展。至今分子生物學(xué)仍在迅速發(fā)展中,新成果、新技術(shù)不斷涌現(xiàn),但分子生物學(xué)的歷史還短,積累的資料還不夠。例如:在地球上千姿萬態(tài)的生物攜帶龐大的生命信息,迄今人類所了解的只是極少的一部分,還未認(rèn)識核酸、蛋白質(zhì)組成生命的許多基本規(guī)律;又如即使到2005年我們已經(jīng)獲得人類基因組DNA3×109bp的全序列,確定了人的5-10萬個基因的一級結(jié)構(gòu),但是要*搞清楚這些基因產(chǎn)物的功能、調(diào)控、基因間的相互關(guān)系和協(xié)調(diào),要理解80%以上不為蛋白質(zhì)編碼的序列的作用等等,都還要經(jīng)歷漫長的研究道路??梢哉f分子生物學(xué)的發(fā)展前景光輝燦爛,道路還會艱難曲折。
平或放大真核細(xì)胞單拷貝基因,通過PCR方法都是不難完成的。
4、特異性強(qiáng) 作為引物的寡核苷酸與模板結(jié)合的正確性是決定反應(yīng)產(chǎn)物是否特異的關(guān)鍵。
5、對原始材料質(zhì)量要求低含微量(pg,ng)的目的DNA的粗制品或者總RNA,就可以用做反應(yīng)起始材料來獲取目的產(chǎn)物。
主要適用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)、環(huán)境科學(xué)、考古學(xué)及歷史事件解讀和衛(wèi)生安全方面。
三、儀器特點(diǎn):
◆可調(diào)節(jié)壓力的熱蓋,防止液體揮發(fā),彩色寬屏顯示,內(nèi)容豐富,色彩鮮明視覺明快。
◆方便靈活的加熱模塊更換裝置,輕松更換所需模塊,可更換彩色孔號標(biāo)記,標(biāo)記更清晰,美觀。
◆新穎的模塊導(dǎo)線插座設(shè)計,真正做到模塊無線更換。
◆*封閉的擴(kuò)增區(qū)域,有效防止液體在管壁的結(jié)露現(xiàn)象,熱蓋壓力報警裝置,防止壓力過大而損壞試管。
◆*的擴(kuò)增區(qū)與操作區(qū)左右結(jié)構(gòu)設(shè)計,使操作者更為方便與安全。
四、型號規(guī)格
樣本容量 | 64×0.2ml | 36×0.5ml |
模塊工作溫度范圍 | 0℃ | 0℃ |
升溫速率 | ≥3.0℃/s | ≥2.8℃/s |
降溫速率 | ≥2.8℃/s | ≥2.5℃/s |
溫度均一性 | ≤±0.5℃(95℃) | ≤± 0.3℃(20℃-75℃) |
溫度精確性 | ≤0.1℃ | ≤0.1℃ |
溫度波動度 | ≤0.1℃ | ≤0.1℃ |
zui大循環(huán)數(shù) | 99 | 99 |
耗能(zui大輸入功率 | 350W | 350W |
外形尺寸(長×寬×高) | 370mm× | 370mm× |
重量 | 4.8kg | 4.8kg |
- 上一篇:K960梯度PCR熱循環(huán)儀
- 下一篇:TAP-2S粉末堆積密度測試儀